CRM-GTX6 膝溝藻毒素6（NRC標準品）是一種經(jīng)認證的校準溶液，專為膝溝藻毒素6（GTX6）的分析方法開發(fā)和準確定量而設(shè)計。該濃度適用于制備用于校準儀器的稀釋系列，例如通過柱前/柱后氧化熒光（LC-ox-FLD）或液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）進行檢測的液相色譜，以及用于回收實驗的加標對照樣品。

在打開之前，應將每個安瓿瓶加熱至室溫，并將內(nèi)容物充分混合。安瓿應在預劃線處打開。應使用校準的體積測定設(shè)備準確轉(zhuǎn)移等分試樣。如果溶液打開幾分鐘以上，溶劑蒸發(fā)會導致濃度增加。建議CRM-GTX6 膝溝藻毒素6（NRC標準品）不應蒸發(fā)至干，因為可能會損失。注意：溶液的體積未經(jīng)認證。僅認證濃度。因此，安瓿的全部成分不應簡單地轉(zhuǎn)移到容量瓶中并稀釋至體積。

CRM-GTX6 膝溝藻毒素6（NRC標準品）的制備是從鏈狀亞歷山大藻的培養(yǎng)生物質(zhì)中分離出來的。提取和分離是在新西蘭Cawthron Ilnstitute進行的。加拿大國家研究委員會（NRC）[4]通過制備規(guī)模色譜法進行了最終純化。GTX6的結(jié)構(gòu)和純度通過LC-MS/MS[5]（圖1和圖2）和NMR確認。使用LC高分辨率MS（LC-HRMS）獲得GTX6的[m+H]*離子的測量準確m/z為396.0926（C1oH:N-OsS11為-1.4ppm）。通過LC ox FLD[6]（圖3）、紫外毛細管電泳（CE UV）[7]和化學發(fā)光氮檢測液相色譜（LC-CLND）[8]進一步評估純度。在CRM-GTX6-b（表2）中存在較低的相對水平的gonyautoxin-5（GTX5）。還檢測到微量的gonyautxin-1和-4。

表2：LC-MS分配的CRM-GTX6-b中GTX5的信息值。

儲備溶液通過在HzO中稀釋純化的GTX6以進行定量1H-NMR（qNMR）[9]來制備。CRM-GTX6-b溶液通過在用乙酸調(diào)節(jié)至pH6的過濾（0.2μm）脫氣去離子水中精確稀釋qNMR儲備溶液而制備。等分試樣被分配到清潔的氬氣填充琥珀色玻璃安瓿中，并立即進行火焰密封。每個安瓿含有大約0.5毫升溶液。

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